尊龙凯时的试剂盒专为科研用途设计,严禁用于临床诊断。该试剂盒基于双抗体一步夹心法的酶联免疫吸附试验(ELISA)原理。实验步骤如下:
检测原理
在已预先包被的adropin(AD)抗体微孔中,依次加入样本、标准品和HRP标记的检测抗体。随后经过适当的温育和彻底的洗涤后,使用底物TMB进行显色。在过氧化物酶的催化下,TMB会转化为蓝色,并在酸性条件下最终转变为黄色。色彩的深浅与样品中adropin(AD)的浓度呈正相关。利用酶标仪在450nm波长下读取吸光度(OD值),进而计算样品的浓度。
样品收集与处理方法
1. 血清:使用不含热原及内毒素的试管,避免操作过程中的细胞刺激。在收集血液后,3000转离心10分钟,仔细分离血清与红细胞。
2. 血浆:使用EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝,再次经过3000转离心30分钟取上清。
3. 细胞上清液:通过3000转离心10分钟去除颗粒与聚合物。
4. 组织匀浆:将组织与生理盐水混合后捣碎,3000转离心10分钟获取上清。
5. 保存:若样品未能及时检测,应按一次用量分装,置于-20℃冷冻,避免反复解冻,在室温下解冻并确保充分均匀。
操作注意事项
试剂盒应贮存在2-8℃,使用前需要在室温下平衡20分钟。取出的浓缩洗涤液可能出现结晶,需在水浴加热至完全溶解后方可使用。实验未用的板条应立即复位于自封袋内并密封保存。
标准品与样本处理
浓度为0的S0号标准品可视为阴性对照,样本在稀释5倍后的最终结果需乘以5来获取实际浓度。务必严格按照说明书中所述的时间、体积及顺序进行操作,并确保所有液体在使用前充分摇匀。
结果判断
在Excel工作表中绘制标准曲线,以标准品浓度为横坐标,对应OD值为纵坐标,依据回归方程计算样本浓度值。利用尊龙凯时的试剂盒进行研究时,可以确保准确度和灵敏度优越,助力科学进步。
免责声明
本试剂盒仅供研究使用,不得用于临床实验或人体实验。所有由此产生的后果均由实验者自行承担,尊龙凯时对此不负任何责任。请遵循说明书操作,违反操作规范将自行承担后果。